适用范围

• 各级医疗机构临床实验室及第三方实验室

阴道微生态概述

• 组成：微生物群、宿主内分泌系统、阴道解剖结构、阴道局部免疫系统
• 维持平衡因素：雌激素、乳杆菌、阴道pH、阴道黏膜免疫系统
• 阴道菌群群落状态类型（CSTs）：卷曲乳杆菌（CST - I）、格氏乳杆菌（CST - II）、惰性乳杆菌（CST - III）、詹氏乳杆菌（CST - V）为主的单一优势菌型；多种厌氧菌组成的CST - IV型
• 阴道局部免疫系统作用：黏膜屏障、免疫调节，与乳杆菌代谢产物构成“免疫 - 微生态网络”
• 评价内容：菌群密集度及多样性、优势菌群判定、菌群抑制及菌群增殖过度、Amsel标准、Nugent评分、Donders评分、改良AV评分、化学检查

标本采集、运送及接收

标本采集

• 采集部位：阴道侧壁、阴道下1/3段、阴道后穹窿、宫颈阴道部
• 采集要求：临床医生无菌操作，采样器具清洁、干燥、无菌，不含化学药品或润滑剂；标本采集前24 - 48h避免性交等，停药3 - 7d，非月经期采样；备注影响阴道菌群因素
• 注意事项：不同人群采样注意动作轻柔、避免刺激、掌握适应证

标本运送

• 室温尽快送检，不超过1h，采集至检测不超过2h
• 怀疑阴道毛滴虫病注意保温、保湿

标本接收

• 标本标识唯一，核对信息完整性等
• 不合格标本拒收，特殊标本可让步检验并备注

共识

• 申请单备注影响微生态因素（2A类推荐）
• 依症状及目的选采样部位，结合人群特点调整（1类推荐）
• 标本尽快送检，注意时间及保温保湿（1类推荐）
• 随访在相同条件采样提高可比性（2A类推荐）

形态学检查

涂片制备及染色

• 制片：手工或仪器制片，确保视野可见足量细菌和（或）上皮细胞，固定涂片；以获均匀涂片为目标；仪器法需评估一致性并保证标准化
• 染色：推荐革兰染色法，与标准比对，仪器染色设置合理程序

显微镜检查

• 菌群密集度：分级标准及临床意义
• 阴道菌群多样性：分级标准及临床意义
• 阴道优势菌群：判断标准及临床意义
• 菌群抑制及菌群增殖过度：判断标准及临床意义
• Amsel标准：判断标准及临床意义
• Nugent评分：评分标准及临床意义
• Donders评分：评分标准及临床意义；作补充
• 改良AV评分：评分标准及临床意义
• 有诊断价值的有形成分：真菌、阴道毛滴虫、革兰阴性双球菌、线索细胞的形态特征及诊断意义

评分法辅助AV诊断

• 推荐革兰染色镜检联合临床特征评分法
• 结合症状体征和化学检查分析

形态学报告指标

• 至少含菌群密集度、多样性和优势菌群类型
• 结合评分评估并描述病原学线索

化学检查

• 项目分类
  • 基础项目：pH、H₂O₂浓度、白细胞酯酶、唾液酸苷酶
  • 补充项目：β -葡萄糖醛酸苷酶、N -乙酰氨基葡萄糖苷酶等
• 检测方法
  • 干化学技术，依酶特异性底物显色
  • 手工法和仪器法
• 临床意义
  • 各实验室依能力和需求组合
  • 不同项目有不同临床意义
• 检查建议
  • 基础项目为必选
  • 补充项目为可选

结果报告

• 三级报告模式
  • 一级报告：图文描述形态和化学检查结果，提供参考范围
  • 二级报告：综合结果给出1 - 2个倾向性诊断
  • 三级报告：提供进一步检验建议及随访方案
• 报告内容细化
  • 形态学检查：含菌群多项指标及病原情况、疾病评分
  • 化学检查：定性结果以阴、阳性报告
• 报告示例
  • 正常微生态报告示例

临床应用

• 破坏因素
  • 内、外源因素破坏阴道微生态
• 正常阴道微生态
  • 菌群特征：密集度和多样性II - III级，优势菌为乳杆菌
  • 关键指标：未检出特定病原体
  • 化学检查：pH正常，乳杆菌功能正常
• 常见阴道炎微生态评价
  • BV
    • 菌群特征：优势菌转变，菌群密度和多样性增加
    • 关键指标：检出线索细胞
    • 化学检查：pH、胺试验、唾液酸苷酶常阳性
  • AV
    • 菌群特征：优势菌为需氧菌，菌群密度和种类增加
    • 关键指标：评分≥ 3分
    • 化学检查：多项指标阳性
  • TV
    • 菌群特征：乳杆菌减少，菌群密集度和多样性增加
    • 关键指标：检出滴虫和大量白细胞
    • 化学检查：多项指标异常
  • VVC
    • 菌群特征：乳杆菌减少，假丝酵母菌过度增殖
    • 关键指标：检出芽生孢子或假菌丝
    • 化学检查：多项指标阳性
• 其他人群评价
  • 青春期：结合症状分析
  • 免疫抑制人群：需积极干预
  • 围绝经期：分情况处理

质量控制

• 室内质控
  • 质控品：化学含阴阳性质控品，形态学可用标准或临床菌株
  • 质控频率：每检测日至少1次
  • 质控规则：化学和形态学各有规则
• 室间质评与室间比对
  • 室间质评：已开展项目参加并符合要求
  • 室间比对：未开展项目半年至少1次，结果符合率≥ 80％合格
• 内部比对
  • 仪器间比对：有系统半年至少1次，符合率≥ 90％合格
  • 人员比对：半年至少1次，人员考核每年至少1次